你好,因为你选择的引物不太合适,最好用一个载体上的通用引物加一条目的基因的特异引物做菌落PCR,这样会大大降低假阳性;如果你用目的基因本身引物做菌落PCR,挑菌时一定要小心不要沾到培养基(里面有大量的未连接的片段),然后PCR扩增的循环数要少(<25),做好阴性对照(在平板上没有斑的地方挑一下),跑出亮亮的目的片段才是真的阳性。