如何检测网站死链接，怎么查看自己网站内链的分布

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1，一般性质：大肠杆菌DNA连接酶是具有75KD的分子量的多肽链上。胰蛋白酶敏感，可被水解。小片段形成后水解仍具有活性的一部分，酶可以催化和NAD（而不是三磷酸腺苷），以形成一个酶-AMP中间体，但不能继续被转移到该DNA的AMP促进的磷酸二酯键的形成。 DNA连接酶约300的分子在大肠杆菌细胞和DNA聚合酶分子Ⅰ类似的数目，这是比较合理的现象。因为DNA连接酶的主要功能是催化DNA聚合酶的聚合Ⅰ填充间隙后的双链DNA上的DNA双链体的单链封闭的间隙上。这在DNA复制，修复和重组中起重要作用，连接酶缺陷突变体不能DNA复制，修复和重组。
T4DNA连接酶噬菌体分子为60KD的多肽链的分子量，它的活性容易抑制为0.2mol / L的KCl和精胺。这种酶的催化过程需要ATP辅助。 T4DNA连接酶连接DNA-DNA，DNA-RNA，RNA-RNA和双链DNA的粘性末端或平末端。另外，NH 4 Cl能提高大肠杆菌DNA连接酶的催化速率，而T4DNA连接酶是无效的。是否T4DNA连接酶或大肠杆菌DNA连接酶催化的2不能连接到游离的DNA链。

2，作用机理：DNA连接酶使用磷酸二酯键是NAD或ATP能量催化两条核酸链之间形成。反应过程可以是在三个步骤：
（1）所形成的共价DNA连接酶ε-氨基的赖氨酸残基的基团上的NAD或ATP腺苷酰基转移酶 - 腺苷酸中间体，而烟酰胺单核苷酸的释放（ NMN）或焦。
（2）酶 - 腺苷酸腺苷酸中间体，然后转移到在5'末端磷酸基团的DNA，形成焦磷酸的衍生物，即DNA-腺苷酸;
（3）活化的5'-磷酰基和3'-OH端可以通过结束反应的DNA磷酸二酯键来合成，而AMP的释放。
DNA连接酶催化的整个过程是可逆的。酶 - 腺苷酸中间体NDA或ATP可以生成和游离酶NMN或具有的PPi反应; DNA-腺苷酸可再生NAD和NMN和游离酶。逆反应可以在AMP共价闭合环状超螺旋DNA连接酶的情况下，存在催化cAMP的产生缺口DNA-产生闭环DNA松弛。