跪求一个简单的植物实验设计（大学生的）求大神帮助

检验2.4-D对水稻种子愈伤组织分化的影响 一、实验目的： 1、理解实验设计的原则； 2、掌握MS培养基的配置； 3、掌握培养基的灭菌及无菌接种的方法； 4、学会初代培养观察和记录方法。 二、实验原理： 愈伤组织分化根和芽受培养基中生长素和细胞分裂素的相对浓度的影响，生长素/细胞分裂素比值高时，促进根的分化；比值低时，则促进芽的分化；两种激素比值适中时，则愈伤组织生长占优势或不分化。这样，通过改变两种激素的相对浓度即可有效地调节愈伤组织再分化的进程。 实验中，主要是利用水稻的颖果进行组织培养，根据用2.4-D浓度不同培养基培养出的植株根和芽的分化的不同来验证生长素对禾谷科植物器官分化的作用。 三、实验器具、药品及材料： 1、器具：培养瓶、电子天平（0.01g）、量子天平（0.0001g）、钥匙、大小烧杯、各种体积的容量瓶、记号笔、PH试纸、镊子、超净工作台等； 2、药品：KNO3、NH4NO3、MgSO4·7H2O、KH2PO4、CaCl2·2H2O、MnSO4·4H2O、ZnSO4·7H2O、H3BO3、KI、Na2MoO4·2H2O、CuSO4·5H2O、CoCl2·6H2O、Na2-EDTA、FeSO4·7H2O、B6、B1、甘氨酸、环己六醇、6-BA、NAA、2，4-D、1MHCl、1MNaOH、0.1%HgCl2、75%酒精等； 3、材料：水稻种子。 四、实验内容和方法： （一）MS培养基母液的配制 1、大量元素母液配制（1000ml，10*）： （1）向1000ml的烧杯中倒入倒约800ml的蒸馏水，放入干净的磁棒，然后将烧杯放在磁力搅拌器上，开启搅拌开关，调整到适当速度。 （2）用百分之一的电子天平依次分别称取：ＮＨ4ＮＯ3 16.5g；KNO3 19.0g；KH2PO4 1.7g；MgSO4·7H2O 3.7g；CaCl·2H2O4.4g按顺序先后倒入烧杯中，待第一种化合物溶解后再加入第二种化合物，当最后一种化合物完全溶解后，将调速钮调至最低，取下烧杯，将溶液倒入1000ml的容量瓶中，用蒸馏水定容至1000ml。 （3）将定容好的溶液倒入细口磨砂试剂瓶中，贴上标签，注明母液名称、配制日期、扩大倍数、Ca浓度，置于4℃冰箱保存备用。 2、ＭＳ微量元素母液的配制（500ml，100×） （1）向500ml的烧杯中倒入大约400ml的蒸馏水，放入干净的磁棒，然后将烧杯放在磁力搅拌器上，开启搅拌开关，调整带适当速度。 （2）用万分之一的电子天平分别依次称取：MnSO4·4H2O 1.1150g；ZnSO4·7H2O 0.4300g；H3BO3 0.3100g；KI 0.0415g；Na2MoO4·2H2O 0.0125g；CuSO4·5H2O 0.0013g；CoCl2·6H2O 0.0013g；逐个倒入装有约400ml蒸馏水的烧杯中，并用磁力搅拌器搅拌逐个溶解。 （3）贴上标签，注明母液名称、配置日期、扩大倍数、置于4℃冰箱保存。 3、铁盐母液的配制（500ml，100×） （1）向500ml的烧杯中倒入大约400ml的蒸馏水，放入干净的磁棒，然后将烧杯放在磁力搅拌器上，开启搅拌开关，调整到适当速度。 （二）培养基的配制和灭菌 1、培养配方（每种培养基200ml） MS+8g/L卡拉粉+30g/L蔗糖 2、配制方法 （1）洗涤各种玻璃器皿、量筒、烧杯、移液管、玻璃棒； （2）将配好的各种储存母液按顺序放好； （3）按照下表配制所需的培养基：（200ml） （4）取500ml烧杯一只，分别用各母液专用移液管分别吸取各母液，置于烧杯中备用(注意：各母液移液管不能混用)； （5）取500ml烧杯一只，分别倒入250ml左右的蒸馏水，准确称量卡拉粉3.8g缓慢倒入烧杯中，并用玻璃棒搅拌均匀，在称蔗糖15g备用。将加入卡拉粉的烧饼置于电炉上煮沸，带卡拉粉完全溶化后，将准备好的含大量元素、微量元素、铁盐、维生素、肌醇和激素的母液混合液倒入烧杯中，并用蒸馏水润洗三遍，最后加入15g蔗糖，充分溶解，加蒸馏水定容至500ml； （6）将不含激素的溶液分装入4只烧杯，按下表加入激素，贴上标签，分别加热至沸 2.4-D、6-BA配置表 培养基 1 2 3 4 2.4-D母液 0.1ml 0.2ml 0.1ml 0 6-BA母液 0.5ml 0.5ml 0 0.5ml （7）用1mol/LHCl或1mol/LNaOH将培养基的PH调至5.8； （8）将四种培养基分别装入培养瓶中（注意：切勿将培养基倒在瓶口或瓶外壁上）。 （9）培养基分装完之后，应马上用专用的耐高温高压的塑料盖盖上，并用记号笔注明培养基名称、配制日期； （10）将培养基放入立式灭菌箱中进行灭菌（刚灭过菌的培养基应在室温下放置2-3天后，观察有无细菌生长，以确定培养基是否彻底灭菌，经检查没有杂菌生长污染，方可使用）。 （三）外植体消毒和接种 1、接种材料的准备：将水稻颖果人工去壳150以上，用洗洁精洗净，再用流水冲洗干净，沥干水分放在干净的瓶子中带到超净工作台上； 2、外植体的消毒：倒75%酒精浸泡30s，用无菌水冲一次，再用镊子将颖果转入0.1%HgCl2消毒12min，用无菌水冲洗6次，备用； 3、接外植体：用无菌的镊子将颖果接入培养基中，每瓶接种5个（接完一瓶，烧镊子），并马上盖上盖子，用记号笔写上接种材料和日期。 （四）观察材料的生长状况并记录 接种后注意观察记录外植体上愈伤组织和根芽出现的时间和数量，加以分析比较。

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