Real-time PCR的原理及优点是什么？

real time PCR，即实时监测PCR扩增产物并进行解析的方法，它是在PCR反应体系中加入荧光物质，并通过real time PCR检测系统对PCR反应进程中的荧光信号强度进行实时监测，最终对实验数据进行分析处理的方法。描述 PCR动态进程的曲线即扩增曲线。它实际上并不是一条标准的指数曲线，而是S形曲线，这是因为随着 PCR循环数的增加DNA聚合酶的失活,dNTP和引物的枯竭，反映副产物焦磷酸对合成反应的阻害等原因，致使PCR并非一直呈指数扩增，而最终将进入平 台期。由于影响PCR扩增的因素错综复杂，因此每次PCR扩增时进入平台期的时机及信号高低变化很大，很难精确控制。尽管平台期的变化很大，但在扩增曲线 的指数增长区的某一区域，重复性非常好，这对PCR的定量分析非常重要，如果在扩增曲线的指数增长区适当位置设定荧光检出界限值即阈值 （threshold）就会得到阈值与扩增曲线的交点Ct值，Ct值是指达到阈值时的循环圈数（threshold cycle），Ct值与起始模板数的对数值成反比线性关系。
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详细资料请参考：on
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