由营养琼脂培养基和平皿组成。主要成分为：牛肉浸出物、酵母抽提物、蛋白胨、氯化钠、琼脂粉、蒸馏水。
将除琼脂以外的各成分溶解于蒸馏水内，加入15%氢氧化钠溶液约2mL，校正pH至7.2～7.4。加入琼脂，加热煮沸，使琼脂溶化。分装烧瓶，122℃高压灭菌15min。注：此培养基可供一般细菌培养之用，可倾注平板或制成斜面。如用于菌落计数，琼脂量为1.5%；如作成平板或斜面，则应为2%。
有一种药品叫做营养琼脂，这种药品是厂商配制好的营养琼脂，可以加水后直接制作培养基，不需要自行配制。此种药品有的已经调好PH，这一点需要注意。
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